Knudson Medium for orkideer

Knudson Medium er et kunstig næringsmedium utviklet i 1946 av den amerikanske botanikeren Lewis Knudson for å spire orkidefrø og fremme vekst under sterile forhold. Det er et av de mest brukte mediene for å dyrke orkideer in vitro og er populært for både laboratorie- og hjemmeapplikasjoner.

Hva er Knudson Medium?

Orkideer vokser naturlig i symbiose med mycorrhizal sopp, som gir viktige næringsstoffer. Å reprodusere denne symbiosen i laboratorieforhold er imidlertid umulig. Knudson Medium ble utviklet som en næringsrik erstatning som forsyner alle essensielle elementer som trengs for frø spiring og frøplantevekst.

Sammensetning av Knudson Medium

Standardformelen inkluderer:

• Sukker: En primær energikilde.
• Mineralsalter:
  • Kaliumnitrat (KNO₃) - En nitrogenkilde.
  • Magnesiumsulfat (MGSO₄) - gir magnesium og svovel.
  • Kaliumdihydrogenfosfat (Kh₂po₄) - leverer fosfor og kalium.
  • Kalsiumklorid (Cacl₂) - En kalsiumkilde.
• Vitaminer:
  • Nikotinsyre, tiamin og pyridoksin for å aktivere metabolske prosesser.
  • Jern, sink, mangan og andre elementer som er viktige for vevsutvikling.
  • Agar-agar for å lage et solid medium, forhindre at frø eller frøplanter synker.
• Sporelementer:
• Geleringsmidler:

Fordeler ved å bruke Knudson Medium

1. Stimulerer frø spiring:
   • Gir alle nødvendige næringsstoffer for spiring, og erstatter behovet for soppsymbiose.
2. Sterilt miljø:
   • Skaper ideelle forhold for vekst uten risiko for bakteriell eller soppforurensning.
3. Optimale vekstforhold:
   • Støtter frøplanteutvikling til de er klare for transplantasjon til et underlag.
4. Passer for forskjellige orkidearter:
   • Formelen kan justeres for å imøtekomme de spesifikke behovene til forskjellige orkideer.

Bruksområder av Knudson Medium

1. Frø spiring:
   • Orkidefrø steriliseres (vanligvis med natriumhypoklorittoppløsning).
   • Sterile frø plasseres på overflaten av næringsmediet i petriskåler eller testrør.
2. Frøplantevekst:
   • Mediet støtter frøplanteutvikling til blader og innledende rotsystemer dukker opp.
3. Transplantasjon til underlag:
   • Når frøplanter når en passende størrelse, blir de transplantert til et passende underlag (f.eks. Bark, Sphagnum Moss).

Hvordan tilberede Knudson Medium?

Ingredienser (eksempel i 1 liter):

• Agar-agar: 10 g
• Sukker: 20 g
• Kh₂po₄: 250 mg
• MGSO₄ · 7H₂O: 250 mg
• Cacl₂ · 2H₂O: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitaminer (tiamin, nikotinsyre): 1 mg hver
• Mikroelementer (f.eks. Feso₄): 1–2 mg
• Destillert vann: 1 l

Trinn:

1. Oppløs alle komponenter i destillert vann.
2. Tilsett agar-agar og varme for å løse den fullstendig.
3. Hell løsningen i sterile beholdere (petriskåler, testrør).
4. Steriliser mediet i et autoklav eller vannbad (15 minutter ved 121 ° C).
5. Avkjøl mediet slik at det skal stivne.

Tips for bruk av Knudson Medium

1. Opprettholde sterilitet:
   • Arbeid under sterile forhold for å forhindre forurensning.
2. Overvåk temperatur:
   • Hold kulturer ved +20–25 ° C.
3. Gi tilstrekkelig lys:
   • Sørg for myk, diffus belysning i 12–14 timer daglig.
4. Transplantasjon:
   • Overfør frøplanter til et underlag når de er store nok for uavhengig vekst.

Konklusjon

Knudson Medium er et kritisk verktøy for å spire orkidefrø og dyrke sunne frøplanter. Det gir den perfekte balansen mellom næringsstoffer for vekst, og eliminerer behovet for soppsymbiose. Dette mediet er ideelt for å forplante sjeldne og dekorative orkidearter, enten det er i et laboratorium eller hjemme.